您好,歡迎光臨壯志生物網站!
關注我們
服務熱線:029-82520312

全部產品分類

您當前位置:首頁 >> 信息列表 >>  售后須知

ABCAM抗體保存指南

時間:2018-01-02 14:54:16 瀏覽:

不同類型抗體的保存指南,避免抗體污染或損壞。

請務必查看數據表,獲取具體的保存建議。我們不對保存不當的抗體負任何責任。如果保存和處理得當,大部分抗體的活性都可保留數月,甚至若干年。

打印抗體保存指南。

您也可以通過手機訪問 Abcam App 獲取我們最常用的實驗方案,Abcam App 可提供多種實驗方案、技術支持和實用工具,方便實驗室科研工作者隨時隨地訪問。更多信息



保存溫度

對于我們的許多抗體而言,分裝為小等份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下凍存是最佳的保存條件。分裝抗體可以最大限度減少凍融對抗體造成的損壞,還可避免多次從同一管中移取抗體而引入污染。分裝后抗體只可凍融一次,如有剩余,應保存在 4 ℃ 下。

收到抗體后,請以 10,000 × g 離心 20 秒,沉降滯留在管蓋螺紋中的溶液,然后分裝抗體并將其轉移至低蛋白質結合的微量離心管中。分裝抗體的量取決于您在實驗中常用的量。分裝抗體應不少于 10 μL;分裝抗體量越少,濃度就越容易受到蒸發以及儲存樣品管表面吸附的影響。

在大部分情況下,可在收到抗體之后立即將其保存于 4 ℃ 下,可保存 1 至 2 周。遵循數據表上的保存建議非常重要。

特例

切勿凍存酶偶聯抗體,而應將其保存在 4 ℃ 下。凍融不僅會影響抗體的結合能力,還會降低酶活性。

偶聯抗體(無論是偶聯有熒光染料、酶還是生物素)應保存在深色樣品瓶中或用錫箔紙包裹樣品瓶。暴露于光下會影響偶聯物的活性。熒光偶聯物尤其容易發生光致漂白,因此在實驗各階段都應避光保存。

IgG3 同型抗體的獨特之處在于其解凍后容易形成聚集體,因此應始終保存在 4 ℃ 下。

腹水液中可能含有蛋白酶,因此收到后應盡快凍存。



污染

為了防止微生物污染,可將疊氮化鈉加入抗體制備物中,疊氮化鈉的最終濃度為 0.02% (w/v)。我們的多款抗體中都含有這種保護劑,其濃度范圍為 0.02%-0.05%。數據表的保存緩沖液部分將對此進行說明。


不使用疊氮化鈉的情況

如果要用抗體對活細胞進行染色或處理,或者要用抗體進行體內研究,請務必使用不含疊氮化鈉的制備物。這種抗菌劑對大部分生物體都有毒害作用:它會阻斷細胞色素電子傳遞系統。

疊氮化鈉會干擾涉及胺基的所有偶聯反應,因此必須在進行偶聯反應之前將其去除。完成偶聯反應之后,可使用疊氮化鈉保存抗體。另一種可用的抗菌劑是 0.01% 硫柳汞鈉(硫柳汞),這種物質不含伯胺。

抗體溶液中的疊氮化鈉可通過滲析或凝膠過濾去除。IgG 的分子量為 150,000 Da(IgM 約為 600,000 Da),疊氮化鈉的分子量為 65 Da。截留分子量為 14,000 Da 的微滲析裝置可使疊氮化物順利擴散出去,而抗體得以保留。

滲析過程在燒杯中(置于磁力攪拌器上,溫度保持 4 ℃)進行,每毫升抗體使用至少 1 升預冷的 PBS,攪拌滲析裝置 6 小時。更換 PBS 兩次,每次更換后均攪拌至少 6 小時。如有可能,所有材料都應滅菌,并且應在無菌條件下處理所得制備物。



凍融損壞

反復凍融可能使抗體變性,導致抗體形成聚集體,從而降低其結合能力。

對大部分抗體而言,在 -20 ℃ 下保存就已足夠;在 -80 ℃ 下保存并無明顯優勢。應避免使用無霜冰箱,因為此類冰箱的凍融循環(用于減少霜的形成)正是保存此類抗體需要避免的。出于相同的原因,應將抗體樣品瓶放在冰箱中溫度波動最小的區域,例如抵靠冰箱背板放置而不是置于冰箱門架上。

有些研究人員向抗體中加入冷凍保護劑甘油(最終濃度為 50%)以防止凍融損壞;甘油可將冷凝點降至 -20 ℃ 以下。雖然這種方法可用于多種抗體,但我們僅對少數幾種 Abcam 抗體在這種保存條件下的穩定性進行了測試,我們僅擔保遵循數據表建議進行保存的抗體的性能。我們不建議在 -80 ℃ 下保存含甘油的溶液,因為該溫度低于甘油的冷凝點。請注意,甘油可能會被細菌污染。如果加入了甘油或任何冷凍保護劑,應當小心操作,確保獲得無菌制備物。



蛋白質濃度和穩定性

將抗體稀釋至工作濃度后,在 4 ℃ 下保存不得超過一天。一般而言,以高濃度保存的蛋白質更不易降解,理想濃度是 1 mg/mL 或更高。這就是將蛋白質(如 BSA)作為穩定劑加入抗體溶液的基本原理。加入的蛋白質還能盡可能減少抗體結合到容器壁上造成的損失。請勿向將要進行偶聯的抗體中加入蛋白質穩定劑,因為蛋白質穩定劑會與抗體競爭,降低偶聯效率。

序號 最新資訊 瀏覽次數 發布時間
1 產品訂購、售后流程圖 246 2018-01-04
2 您買的Abcam產品是正品嗎? 155 2018-01-03
3 Abcam產品訂購須知 217 2018-01-03
新网球王子